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      當前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  基因檢測PCR試劑盒  >  熒光定量PCR  >  50次戊型肝炎病毒RT-PCR試劑盒

      戊型肝炎病毒RT-PCR試劑盒

      簡要描述:戊型肝炎病毒RT-PCR試劑盒及公司相關(guān)產(chǎn)品糖元三型,英文名或英文縮寫:Glycogen from rabbit liver,級別:超純,98%,規(guī)格:5克 HumanfibrinopeptideA,FPAELISAKit人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
      139177-64-3三扶磺酸鉺ERBIUM (III) TRIFLUOROmetxANESULFONAT

      • 產(chǎn)品型號:50次
      • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      • 更新時間:2024-01-02
      • 訪  問  量:634

      詳細介紹

      PCR實驗步驟:
      取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
      兩相分離 1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
      RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
      RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,47000rpm離心5分鐘。
      RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
      溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

      原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0E1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
      特異性強
      PCR
      反應(yīng)的特異性決定因素為:
      引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
      堿基配對原則;
      Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
      靶基因的特異性與保守性。
      產(chǎn)品名稱:戊型肝炎病毒RT-PCR試劑盒 
      產(chǎn)品規(guī)格: 50
      產(chǎn)品貨號:BK-P97024
      儲存條件:-20避光保存,避免反復凍融。
      運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

      產(chǎn)品特點:
      高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
      高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
      操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
      高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
      產(chǎn)品特點:
      1.
      使用化學修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
      2.
      反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
      3.
      抗干擾能力強,反應(yīng)重復性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
      PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

      特異性熒光標記:
      TaqMan

      TaqMan
      探針的特性:
      15′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAMVIC
      23′端標記有熒光淬滅基團 Quencher, Q
      3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, RQ分開,發(fā)熒光
      4Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
      相對定量通過內(nèi)標定量:
      內(nèi)標(Endogenous Control)通常是β-actinGAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標定量結(jié)果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。

      實驗注意事項:
      1
      RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
      2
      )客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
      3
      )客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
      4
      )樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
      實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNARNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
      主要服務(wù):DNARNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
      主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
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