馬、驢源性核酸檢測試劑盒 PCR-熒光探針法

注意事項：產(chǎn)品僅用于科研1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱：馬、驢源性核酸檢測試劑盒 PCR-熒光探針法 
規(guī)格： 48T
貨號：BK-P97210
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。

特點優(yōu)勢：
   1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
   2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
   3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
   4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
甲氨蝶呤-甲基-d3Methotrexate-methyl-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口  DuckIerleukin-4,IL-4ELISA試劑盒鴨白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4'-羥基尼美舒利4'-Hydroxy Nimesulide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口  藻類菌脂質(zhì)綠色熒光染色試劑盒20  小鼠降鈣素原(PCT)試劑盒 Mouse Procalcitonin,PCT ELISA K
膠原酶I型(sigma)質(zhì)量規(guī)格：≥125 CDU/mg ,Sigma分裝Collagenase, Type1  HumanBcl-2associatedXprotein,BaxELISA試劑盒人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  雞壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

膠原酶II型(sigma)質(zhì)量規(guī)格：≥125 CDU/mg ,Sigma分裝Collagenase, Type2  植物種子活性葉綠體分離試劑盒20  人載脂蛋白C3(Apo-C3)試劑盒 Human Apo-C3 ELISA Kit

膠原酶IV型(sigma)質(zhì)量規(guī)格：≥160 CDU/mg,Sigma分裝Collagenase, TypeIV  Huma-cellacelymphoblasticleukemiaaigen,TALLA-1ELISAKit人T細(xì)胞急性母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒 ，英文名： HLA-C ELISA Kit

鉬酸鈉二水(AR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR molybdate  小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA試劑盒 ，英文名： H ELISA Kit  RatCollageypeⅠ,ColⅠELISA試劑盒大鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人上皮細(xì)胞;Ca Ski一鹽基嶙酸，英文名或英文縮寫：Ammonium dixy7nogen phosphate，級別：AR;99%，規(guī)格：25克

人肝間充質(zhì)干細(xì)胞(肝)(HMSC-HE)(5×105)地塞米1酸鈉 Dexamethasone  phosphate 2392-39-4 1G 通用試劑

CM-R016大鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL高錄醋(*)(易制暴) litxium pqrchlorctq trihydrctq 13423-78-6

綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC-GFP 小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL錫青銅shēng huà shì jì容量：250克

mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 MousePH緩沖液　PH11.0(20℃)NA
馬、驢源性核酸檢測試劑盒 PCR-熒光探針法EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)外消旋左旋甲狀腺素鈉質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口DL-Levothyroxine

ZR-75-30(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH2β-煙酰胺腺嘌呤二核苷1酸酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate  salt

人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHAEC NA硫酸腺嘌呤二水化合物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Adenine