輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱：輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣

檢測方法：可見分光光度法

產(chǎn)品貨號：BK-01S6350

產(chǎn)品分類：輔酶Ⅱ系列
商品介紹：

所需的儀器和用品：

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗

樣本和試劑浪費！

1、樣本制備

實驗方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

2 ug pCAMBIA2330 pCAMBIA2330 低溫運輸，-20℃保存

纖維二糖-（CC）瓊脂 Cellobiose-polymyxin E Agar 250g

10g  Indole  室溫保存

50T 鏈球菌B族PCR檢測試劑盒   低溫運輸，-20℃保存

5mL 黑色素細胞生長因子-不含TPA Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

250mL Beta-ME-EDTA Solution（beta-EDTA溶液）  Beta-ME-EDTA Solution  常溫保存

1.5mL miRNA尿素-PAGE上樣液,6× miRNAoN -20℃保存

2 ug pGCsi/H1/Neo SHGFP pGCsi/H1/Neo SHGFP 低溫運輸，-20℃保存

抗生素檢定培養(yǎng)基8號 Antibiotic Agar NO.8 250g

1瓶 Cyc-Tag(S49)細胞株 Cyc-Tag(S49) 低溫運輸和保存

CIN-1瓊脂平板（9cm） CIN-1 Agar 10個/包

輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法CDKL3/NKIAMRE  細胞周期蛋白依賴性激樣3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-pig IgG  兔抗豬IgG 規(guī)格: 1mg

Bestrophin 4  卵黃狀黃斑蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

BRCC4/BRCC45  易基因復(fù)合蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat anti-Rabbit IgG whole serum  羊抗兔IgG抗清 規(guī)格: 1ml

phospho-ITGB4(Tyr1494)  磷酸化整合素β4抗體 規(guī)格: 0.1ml

LARG  Rho的核苷酸交換因子12抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的兔抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml

phospho-Tau protein(Ser214)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

LDHC/Cancer,testis antigen 32  酸脫LDH-C（瘤/睪抗原32）抗體 規(guī)格: 0.1ml

MAGEA11  黑色素瘤相關(guān)抗原11抗體 規(guī)格: 0.2ml 

注意事項：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時間不夠，可以延長反應(yīng)時間（反應(yīng)時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。