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      二胺氧化酶(DAO)測試盒可見分光光度法

      簡要描述:二胺氧化酶(DAO)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:A-1培養(yǎng)基 英文名稱:A-1 Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g M-Endo肉湯 英文名稱:M-Endo Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g CCFA瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱:CCFA Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g 雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 英文名稱:Double Lactose Bile Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

      • 產(chǎn)品型號:
      • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      • 更新時(shí)間:2023-12-29
      • 訪  問  量:1493

      詳細(xì)介紹

      注意事項(xiàng):

      1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

      2、對照管只需要做一管。

      3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

      4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

      對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

      若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

      特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

      產(chǎn)品名稱:二胺氧化酶(DAO)測試盒可見分光光度法

      產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

      檢測方法:可見分光光度法

      產(chǎn)品貨號:BK-01S6430

      產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
      商品介紹:

      測定意義:

      DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動(dòng)物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān),能夠反映腸道機(jī)械屏障的完整性和受損傷程度。

      測定原理:

      DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過氧化氫,外源添加過量的辣根過氧化物酶,催化過氧化氫氧化鄰聯(lián)茴香胺生成有色物質(zhì),在460nm處有特征吸收峰,通過測定該波長吸光度增加速率,計(jì)算DAO活性。

      自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

      天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水。

      所需的儀器和用品:

      可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

      四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

      建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

      樣本和試劑浪費(fèi)!

      1、樣本制備

      組織樣本:

      取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

      勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

      【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

       

      細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

      先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

      提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

      12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

      【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

      4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

      QQ截圖20220307153537.png 

      實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

      一、肝素的配制:

      市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

      肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

      二、血液樣本的收集:

      全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

      1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

      2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

      選擇抗凝的注意點(diǎn):

      ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

      ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

      ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

      ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

      用于測定。

      100mL Bicine Buffer,0.5M,pH7.4   Bicine Buffer,0.5M,pH7.4   常溫保存

      革蘭氏陰性菌增菌液 Gram Negative Bacteria Enrichment Broth 250g

      5g 雙 (2-  ) 亞氨基三 ( 羥甲基 ) 甲烷 Bis-Tris 室溫干燥保存

      500mL Tris-HCl Buffer,2.0M,pH7.5  Tris-HCl Buffer,2.0M,pH7.5  常溫保存

      1mL 植物蛋白抑制劑 Protease Inhibitor for Plant -20℃保存

      2 ug pTT5 pTT5 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

      30次 凝固血液DNAout Blood Clot DNAOUT 常溫

      2 ug pEF6/myc-His C pEF6/myc-His C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

      M17瓊脂 M17 Agar 250g

      250mg 噻唑蘭 Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide(MTT)  4℃避光保存

      96支 10 μL RNase-free白吸頭(盒裝已滅菌長尖)  常溫

      二胺氧化酶(DAO)測試盒可見分光光度法Jun D  活化蛋白激D抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1ml

      Donkey Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlFMDV Polyprotein (VP1 protein)   口蹄疫毒A型抗體 規(guī)格: 1ml

      Rabbit Anti-human IgG F(ab')2  兔抗人IgG F(ab')2  規(guī)格: 1mgSOX10  轉(zhuǎn)錄因子SOX10抗體 規(guī)格: 0.2ml

      AIF  調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體 規(guī)格: 0.1mlMAGEA2  黑色素瘤相關(guān)抗原2抗體 規(guī)格: 0.2ml

      GATA6  GATA結(jié)合蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1mlR Cadherin  R Cadherin/CDH4 規(guī)格: 0.2ml

      RND3/RHOE  Rho家族GTP3抗體 規(guī)格: 0.1mlCDCA7  細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白 規(guī)格: 0.2ml

      eIF4G  真核翻譯起始因子4G抗體 規(guī)格: 0.1mlNIK/MAPKKK14  NFkB誘導(dǎo)激抗體 規(guī)格: 0.1ml

      CT-1/CTF1  心肌營養(yǎng)素1抗體 規(guī)格: 0.1mlNRH2  死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Rabbit Anti-Goat IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗羊IgG 規(guī)格: 0.1mlInsulin Receptor R  胰島素受體相關(guān)受體抗體 規(guī)格: 0.2ml

      RP1/DCDC4A  視網(wǎng)膜色素變性蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlPCSK9/NARC1  神經(jīng)細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化蛋白1抗體(前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌素9) 規(guī)格: 0.1ml

      StAR/StARD1  促黃體激素誘導(dǎo)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlCNOT6  細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml

      BCAS3  相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlPAFAH1B3/PAFAHG  小板衍化生因子γ抗體 規(guī)格: 0.2ml 

       


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