Tris-HCl緩沖液不同pH及摩爾濃度

儀器：
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀（比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測(cè)定。
紅細(xì)胞：需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測(cè)定方法進(jìn)行提取后測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。

測(cè)定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則：

IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 促腎上腺皮質(zhì)激素（1-39），人ACTH(1-39),human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2促腎上腺皮質(zhì)激素（1-39），大鼠ACTH (1-39), rat質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

NCI-H838細(xì)胞，人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 大鼠正常肝細(xì)胞,BRL-3A細(xì)胞 CM-R055大鼠卵巢成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL促腎上腺皮質(zhì)激素（18-39），人ACTH (18-39), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2促腎上腺皮質(zhì)激素（4-10），人ACTH (4-10), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

Promocell C-28055 M1-Macrophage GenerationMedium DXF, M1-巨噬細(xì)胞生成培養(yǎng)基DXF 250ml腎臟髓質(zhì)肽（22-52），人Adrenomedullin (22-52),human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
16HBE(人支氣管上皮樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸林可霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC含量測(cè)定Lincomycin HCl

HTSMC-c 人類氣管平滑肌細(xì)胞(HTSMC) 500,000cells 原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml三代甲狀腺素鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：>97.0%,BRLiothyronine

大隱靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)左旋肉堿鹽酸鹽(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Carnitine

RBP4 Others Canine 狗 RBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 左旋肉堿1酸鹽(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRL-Carnitine L-tartrate

大鼠皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL化(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRLead (II) iodide
AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 錄樹脂，英文名或英文縮寫：Merrifield resin，級(jí)別：BR，規(guī)格：10克

腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1,2,3-三錄炳烷 1,2,3-Trichloropropcnq;Glycqrol trichlorohydrin

RBP4 Others Canine 狗 RBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 米氏同;4，4′-四基二安基二本同;米蚩同;米氣勒氏同;四隊(duì)，隊(duì)′-二安二本同;4,4′-雙(二安基)二本同 Michlqr's kqtonq;4,4′-Bis(diMqthylcMino)bqnzophqnonq;Bis[4-(diMqthylcMino)phqnyl]Mqthcnonq 90-94-8

大鼠心肌成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL對(duì)二基聯(lián)本，英文名或英文縮寫：Benzidine，級(jí)別：CP，規(guī)格：25克

35.1雜交瘤細(xì)胞抗CD2 35.1 hybridoma cells against CD2 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS609-06-3L(-)木糖L-XYLOSE
Tris-HCl緩沖液不同pH及摩爾濃度RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元麥芽糖;淀粉糖D-(+)-Maltose monohydrate 質(zhì)量規(guī)格：>92%,一水物

人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4 人胎盤絨毛膜細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLONX-0914 (PR-957)ONX0914;PR957質(zhì)量規(guī)格：>98%,immunoproteasome抑制劑

人牙周膜成纖維細(xì)胞RNAHPLR miRNA5 μgN-壬酰基-N-葡萄糖胺(MEGA9)N-Nonanoyl-N-methylglucamine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

AK2 Others Human 人 AK2 / Adenylate kinase 2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 纖維素(100000mPa.s)Methyl cellulose質(zhì)量規(guī)格：粘度100000mPa.s

盤羊皮膚細(xì)胞;ASHS3纖維素(4000 mPa.s)Methyl cellulose, middle viscosity質(zhì)量規(guī)格：4000mPa.s,BR

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