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      β半乳糖苷酶(βGAL)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度

      簡(jiǎn)要描述:β半乳糖苷酶(βGAL)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:葡萄糖酸鹽-雙岐桿菌鑒定 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:20支 雙岐桿菌生化試驗(yàn)無(wú)糖對(duì)照 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:20支 醇發(fā)酵管-O157菌生化鑒定 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:20支 纖維二糖-O157菌生化鑒定 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:20支

      • 產(chǎn)品型號(hào):
      • 廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
      • 更新時(shí)間:2023-12-26
      • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:665

      詳細(xì)介紹

      特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

      產(chǎn)品名稱(chēng):β半乳糖苷酶(βGAL)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度

      產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

      檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法

      產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6750

      產(chǎn)品分類(lèi):糖代謝系列
      商品介紹:

      測(cè)定意義:

      β-GAL(EC 3.2.1.23)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,能夠催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷鍵水解,此外還具有轉(zhuǎn)半乳糖苷的作用。β-GAL不僅可為植物的快速生長(zhǎng)釋放儲(chǔ)存的能量,還能在正常的多糖代謝、細(xì)胞壁組分代謝以及衰老時(shí)細(xì)胞壁降解過(guò)程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖殘基的水解,釋放自由的半乳糖。

      測(cè)定原理:

      β-GAL分解對(duì)-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成對(duì)-硝基,后者在400nm有最大吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算β-GAL活性。

      自備用品:

      可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

      所需的儀器和用品:

      可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

      四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

      建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

      樣本和試劑浪費(fèi)!

      1、樣本制備

      組織樣本:

      取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

      勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

      【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

       

      細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

      先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

      提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

      12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

      【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

      4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

      QQ截圖20220307153537.png 

      實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

      一、肝素的配制:

      市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

      肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

      二、血液樣本的收集:

      全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。

      1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

      2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

      選擇抗凝的注意點(diǎn):

      ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

      ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

      ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

      ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

      用于測(cè)定。

      250mL Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.6   Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.6   常溫保存

      10mL 溶液,50mg/mL Spectinomycin Solution 4℃避光干燥保存

      2 ug pQE-30LacIq pQE-30LacIq 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

      3%NaCl阿拉伯糖  20支

      250mL MES Buffer,1.0M,pH7.5   MES Buffer,1.0M,pH7.5   常溫保存

      產(chǎn)毒培養(yǎng)基 Toxin-Producing Medium 250g

      5g α- 酮戊二酸 α-Ketoglutaric Acid 4℃保存

      50T 輪狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

      5mL 口腔角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

      100mL AMPD Buffer,0.2M,pH8.0  AMPD Buffer,0.2M,pH8.0  常溫保存

      1000mL 超快核酸銀染試劑盒 Rapid Silver Stain for Nucleic Acid 常溫

      β半乳糖苷酶(βGAL)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度Rabbit Anti-Bov IgG/Cy5  Cy5標(biāo)記的兔抗牛IgG  規(guī)格: 0.1ml

      BNP(H1G3)  人腦鈉素單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml

      AMPD3  紅細(xì)胞苷脫氨3抗體 規(guī)格: 0.2ml

      synaptotagmin-2  突觸結(jié)合蛋白相關(guān)基因2抗體 規(guī)格: 0.1ml

      CDK8  周期素依賴(lài)性激8抗體 規(guī)格: 0.1ml

      Rabbit Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗牛IgG  規(guī)格: 0.1ml

      Donkey Anti-Goat IgG/FITC  FITC標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.3ml

      MARK2  絲/蘇蛋白激MARK2抗體 規(guī)格: 0.2ml

      FAM70A  FAM70A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Goat Anti-Chicken IgG  羊抗雞IgG 規(guī)格: 1mg

      NDUFS3  線(xiàn)粒體復(fù)合物NDUFS3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Band3/CD233  紅細(xì)胞陰離子交換蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml 

      注意事項(xiàng):

      1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

      2、對(duì)照管只需要做一管。

      3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

      4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

      對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

      若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

       


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