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      土壤羥胺還原酶(HR)測試盒微量法

      簡要描述:土壤羥胺還原酶(HR)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:YPD瓊脂 進(jìn)口、國產(chǎn)Yeast Peptone Dextrose Agar用于測定酵母菌總數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))250抗生素檢定1號(高PH) 進(jìn)口、國產(chǎn)Antibiotic Agar 用于鏈,卡那,慶大,紅等效價(jià)測定250抗生素檢定1號(低PH) 進(jìn)口、國產(chǎn)Antibiotic Agar 用于磺芐青效價(jià)測定250抗生素檢定2號(高PH) 進(jìn)

      • 產(chǎn)品型號:
      • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      • 更新時(shí)間:2023-12-25
      • 訪  問  量:566

      詳細(xì)介紹

      實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

      一、肝素的配制:

      市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

      肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

      二、血液樣本的收集:

      全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

      1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

      2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

      選擇抗凝的注意點(diǎn):

      ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

      ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

      ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

      ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

      用于測定。

      特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

      產(chǎn)品名稱:土壤羥胺還原酶(HR)測試盒微量法

      產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣

      檢測方法:微量法

      產(chǎn)品貨號:BK-01S6870

      產(chǎn)品分類:土壤系列
      商品介紹:

      測定意義:

      土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨,土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體,其強(qiáng)弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發(fā)損失,間接影響氮肥的利用效率。

      測定原理

      硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮?dú)猓陨肀贿€原為Fe2+Fe2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物,在510nm處有吸收峰,羥胺還原酶作用于羥胺,使配合物形成量減少,510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。

      自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

      天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀、氮吹儀。

      所需的儀器和用品:

      可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

      四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

      建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

      樣本和試劑浪費(fèi)!

      1、樣本制備

      組織樣本:

      取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

      勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

      【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

       

      細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

      先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

      提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

      12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

      【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

      4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

      QQ截圖20220307153537.png 

      注意事項(xiàng):

      1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

      2、對照管只需要做一管。

      3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

      4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

      對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

      若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

      2 ug pLVPT-GDNF-rtTR-KRAB-2SM2 pLVPT-GDNF-rtTR-KRAB-2SM2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

      葡萄糖天門冬素 Glucose Asparagine Medium 250g

      1瓶 NCI-H520細(xì)胞株 NCI-H520 低溫運(yùn)輸和保存

      雙料月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LST)  250g

      25g 鈉 Barbital Sodium 室溫保存

      50T 阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因間序列(78bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒   低溫運(yùn)輸,-20℃保存

      100mL Bradford法蛋白定量試劑盒 Bradford Protein Assay Kit 常溫保存,BSA標(biāo)準(zhǔn)需要-20℃保存

      2 ug pTRE-Tight-BI pTRE-Tight-BI 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

      200次 柱式血液DNAout Column Blood DNAOUT 常溫

      2 ug pECFP- ER pECFP- ER 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

      CIN-1瓊脂平板9cm Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 10個(gè)/包

      土壤羥胺還原酶(HR)測試盒微量法OGFOD1  末端多聚苷酸1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

      KCND1/Kv4.1  電壓門控鉀通道Kv4.1抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Rabbit Anti-mouse IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.5ml

      AT1R/AGTR1  管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

      CCNYL1  周期素樣Y1抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Quiescin Q6/QSOX1  巰基氧化1抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Rabbit Anti-mouse IgG/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

      DIRC2  干擾細(xì)胞蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

      Thymidylate synthase/TS  胸苷酸合成抗體 規(guī)格: 0.1ml

      IHH  HHG2抗體 規(guī)格: 0.2ml

      phospho-DDX58 (Ser8)  磷酸化DDX58抗體 規(guī)格: 0.1ml

      Azurocidin/Cationic antimicrobial protein 37  肝素結(jié)合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體 規(guī)格: 0.2ml 

       


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