巴西諾卡菌PCR檢測試劑盒廠家

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

原理是由一對引物介導(dǎo)，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
?
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

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巴西諾卡菌PCR檢測試劑盒廠家IQSEC2抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：IQSEC2

白介素-23受體抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：IL-23R

干擾素誘導(dǎo)蛋白44抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：IFI44

FC段γ受體3/免疫球蛋白G Fc段受體III抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：CD16

胰島素樣生長因子1受體抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：IGF1R

KB抑制蛋白激酶ε 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：IKB epsilon

白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：IRAK1

氨基末端激酶1/3抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：JNK1 + JNK3

Kelch樣蛋白10抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：KLHL10

肝果糖激酶抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：Ketohexokinase

kappa型阿片受體抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：kappa Opioid receptor

含亮氨酸神經(jīng)膠質(zhì)瘤失活蛋白4抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：LGI4

LRRC59蛋白抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：LRRC59

轉(zhuǎn)錄因子LHX6抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：LHX6

轉(zhuǎn)錄因子LMCD1抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：LMCD1