李斯A特菌通用PCR檢測試劑盒說明書

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環擴增，擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

?
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術原理：
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。

小鼠白介素1(IL-1)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠八聚體結合轉錄因子4（OCT4）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠氨基脲敏感性胺氧化酶（SSAO）ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠癌胚抗原(CEA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠β細胞素(BTC)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠β萘酚(β-naphthol)LISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

小鼠β內酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

李斯特菌通用PCR檢測試劑盒說明書人細胞周期素D2 96THuman Cyclin-D2 ELISA Kit

小鼠腦紅蛋白 96TNGB(Mouse Neuroglobin) ELISA Kit

大鼠游離前列特異性抗原 96TfPSA ELISA Kit

人Ⅱ型膠原 96TCol II (Human Collagen Type II ) ELISA Kit

小鼠神經膠質纖維酸性蛋白 96TGFAP(Mouse glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit

人抗磷脂酰絲氨酸抗體 96TAPSA(Human Anti-phosphatidyl serine antibody) ELISA Kit

小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基 96TsRANKL(Mouse soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand)ELISA Kit

小鼠神經肽Y 96TNP-Y(Mouse neuropeptide Y) ELISA Kit

人谷氨酸脫羧酶自身抗體 96TGAD-Ab(Human glutamic acid decarboxylase autoantibody) ELISA Kit

人抗硬皮病抗體70 96TSCL70/topo I (Human anti-scl70 antibody) ELISA Kit

人麻疹病毒 96TMV(Human morbillivirus) ELISA Kit

人軍團菌抗體IgM 96TLP Ab-IgM (Human Legionella antibody IgM) ELISA Kit

人毒蕈堿型乙酰膽堿受體 96TM-AChR(Human muscarinic acetylcholine receptor) ELISA Kit

大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ 96TBMPR- II ELISA Kit

人雌三醇 96TE3(Human Estriol) ELISA Kit