三線鐮刀菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
?
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

蟾靈;Bufalin CAS 465-21-4 *  規(guī)格： 20mg

補(bǔ)骨脂二氫黃甲 ;Bavachini CAS 19879-30-2 *  規(guī)格： 20mg

白頭翁皂苷B4;Anemoside B4 CAS 129741-57-7 *  規(guī)格： 20mg

阿魏酸;Ferulic acid CAS 1135-24-6 *  規(guī)格： 50mg

磺草;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品-甲磺草;有 CAS 104206-82-8 *  規(guī)格： 0.1g

藻醌;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 2797-51-5 *  規(guī)格： 0.1g

丙;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 51218-49-6 *  規(guī)格： 0.1g

丙森辛(異丙菌胺);純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證 CAS 140923-17-7 *  規(guī)格： 0.1g

瘟靈;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 50512-35-1 *  規(guī)格： 0.1g

避蚊酯(鄰苯二二甲酯);純品型;標(biāo)準(zhǔn) CAS 131-11-3 *  規(guī)格： 0.1g

烯丙;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 28434-00-6 *  規(guī)格： 0.1g

果;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 25954-13-6 *  規(guī)格： 0.1g

噻啉;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 111988-49-9 *  規(guī)格： 0.1g

梔子苷-對(duì)照品;有報(bào)告 CAS 24512-63-8 *  規(guī)格： 20mg

糖精鈉;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 82385-42-0 *  規(guī)格： 0.25g

三線鐮刀菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞  U251

小鼠結(jié)腸細(xì)胞  CT-26 WT

細(xì)菌篩選培養(yǎng)基/Bacterium Screening MediumBR100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

卵黃鈉瓊脂培養(yǎng)基/Egg-Yolk Salt Agar金黃色葡萄球菌的選擇性分離250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

布氏菌選擇性培養(yǎng)基/Brucella Selective Medium布氏菌的選擇性分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

CLED培養(yǎng)基/溴百里酚藍(lán)糖胱氨酸瓊脂/CLED Medium/BROLACIN Agar/Bromothymol-blue Lactose Cystine Agar/Cystine-Lactose-Electrolyte Deficient Agar尿液中微生物的選擇性分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

四硫磺酸鈉亮綠增菌液 規(guī)格： 2X5支 用途： 含碘液2ml/支和煌綠1ml/支，2支添加于100mL（023031）中配成TTB

SCDLP液體培養(yǎng)基 規(guī)格： 250g 用途： 用于疏水性化妝品樣品處理及化妝品和一次性使用衛(wèi)生用品增菌培養(yǎng)(化妝品衛(wèi)生規(guī)范微生物檢驗(yàn)方法2...

Toll樣受體2(TLR2)重組蛋白  Recombinant Toll Like Receptor 2 (TLR2)

脯氨酸/絲氨酸豐富卷螺旋蛋白1(PSRC1)重組蛋白  Recombinant Proline/Serine Rich Coiled Coil protein 1 (PSRC1)

粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF)重組蛋白  Recombinant Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte Macrophage (GMCSF)

無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3(WNT3)重組蛋白  Recombinant Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3 (WNT3)

ACHN(人腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

S-180(小鼠瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2