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      貓杯狀病毒PCR檢測試劑盒說明書

      簡要描述:貓杯狀病毒PCR檢測試劑盒說明書上海帛科生物相關產品:EB-3(人Burkitt淋巴瘤細胞)人腺腺細胞

      爪哇霉 Rhizopus javanicus大鼠肺大動脈內皮細胞*培養基

      小鼠膀胱上細胞*培養基100mL

      體改良馬丁培養基/Martin Broth,Modified(Liquid)菌苗

      • 產品型號:50次
      • 廠商性質:經銷商
      • 更新時間:2023-12-17
      • 訪  問  量:397

      詳細介紹

      注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

      產品名稱

      英文名稱

      貨號

       貓杯狀病毒PCR檢測試劑盒說明書

       Feline Calicivirus(FCV)RTPCR

      BK-P9164

      原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
       特異性強
      PCR反應的特異性決定因素為:
      ①引物與模板DNA特異正確的結合;
      ②堿基配對原則;
      ③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
      ?
      實驗過程:
      一、試劑準備
      1. DNA模板
      2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
      4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

      EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞)5×106cells/瓶×2

      大鼠成肌細胞英文名稱:L6

      橢孢青霉 Penicillium ellipsoideosporum玫瑰栗色鏈霉菌 Streptomyces rosecastaneus

      NCI-H295R(人腎上腺皮質腺細胞)大豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

      MR-VP發酵管BR20支國產/進口

      EB-3(人Burkitt淋巴瘤細胞)人腺腺細胞

      爪哇霉 Rhizopus javanicus大鼠肺大動脈內皮細胞*培養基

      小鼠膀胱上細胞*培養基100mL

      體改良馬丁培養基/Martin Broth,Modified(Liquid)菌苗制造、生物制品和血制品真菌無菌檢驗250克國產/進口

      His標簽蛋白裂解20 ug

      毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes吸水鏈霉菌井崗變種 Streptomyces hygroscopicus var. jinggangensis

      貓杯狀病毒PCR檢測試劑盒說明書1-丁-3-甲氯吡鎓  185.7  1- butyl -3- methyl pyridinium chloride*:125652-55-3分子量: C10H16ClN

      2,4-二氟三氟甲  182.09  2,4- three f two f*:64248-61-9分子量: C7H3F5

      并惡唑  119.12  Benzoxazole*:273-53-0分子量: C7H5NO

      2,5-雙(溴甲)-1,4-雙(辛氧)  520.386  2,5- bis (Xiu Jiaji) -1,4- bis (Xin Yangji) benzene*:147274-72-4分子量: C24H40Br2O2

      5-三氟甲尿嘧  180.08  5- three fluorine uracil*:54-20-6分子量: C5H3F3N2O2

      羅通定  Luo Tongding  355.427分子量:C21H25NO4*:10097-84-4

      七葉皂苷鈉  Seven leaves saponins sodium  分子量:*:20977-05-3

      C.I.分散紅17  C.I. disperse red 17  344.369分子量: C17H20N4O4*:3179-89-3

      天青石藍  Celestine blue  363.8分子量: C17H18ClN3O4*:1562-90-9

      炔丙  116.16  Phenyl group*:10147-11-2分子量: C9H8

      4-(二氟溴甲)溴    4- (Xiu Jiaji - two f)*:2358-32-9分子量:

      技術原理:
       DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
             在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
             發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。

       

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