絲狀網尾線蟲PCR檢測試劑盒說明書

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環擴增，擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

;純品型;標準品;有證書 CAS  *  規格： 0.1g

鈴脲;純品型;標準品;有證書 CAS 64628-44-0 *  規格： 0.1g

右旋烯丙;純品型;標準品;有證書 CAS 584-79-2 *  規格： 0.1g

磺隆成分析標準物質;有證書 CAS 64902-72-3 *  規格： 0.1g

甲霜靈;純品型;標準品;有證書 CAS 57837-19-1 *  規格： 0.1g

雷公藤紅素-對照品;有報告 CAS 34157-83-0 *  規格： 20mg

果糖成分分析標準物質 CAS 57-48-7 *  規格： 0.1g

2-甲苯;純品型;標準品 CAS  *  規格： 0.5g

旱蓮苷D CAS  *  規格： HPLC≥98%;20mg

鬧羊花素III CAS 26342-66-5 *  規格： HPLC≥98%;20mg

地骨皮乙素 CAS 164991-67-7 *  規格： HPLC≥98%;20mg

米托拉 CAS 87626-55-9 *  規格： HPLC≥98%;20mg

氫樟柳堿 CAS 76822-34-9 *  規格： HPLC≥98%;20mg

竹紅菌甲素 CAS 77029-83-5 *  規格： HPLC≥98%;20mg

氧化槐定堿 CAS 54809-74-4 *  規格： HPLC≥98%;20mg

絲狀網尾線蟲PCR檢測試劑盒說明書卵黃多粘菌素B溶液/Egg-Yolk Polymyxin B Solution甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎配套試劑50毫升國產/進口

丙二酸鹽發酵管BR20支國產/進口

CHO培養基基礎/CHO Medium Base厭氧菌的糖生化反應250克國產/進口

人淋巴上皮細胞*培養基100mL

小鼠頜下腺上皮細胞*培養基100mL

麥康凱瓊脂 規格： 250g 用途： 供分離發酵糖的革蘭氏性腸道桿菌(GB/T4789.28－2003 中4.24和 GB/T4789.5－2003 ）。

含鐵牛奶培養基 規格： 250g 用途： 用于飲用天然礦泉水中產氣莢膜梭菌的測定。（GB/T 8538-2008）

Toll樣受體6(TLR6)重組蛋白  Recombinant Toll Like Receptor 6 (TLR6)

輔肌動蛋白α2(ACTN2)重組蛋白  Recombinant Actinin Alpha 2 (ACTN2)

連接附著分子3(JAM3)重組蛋白  Recombinant Junctional Adhesion Molecule 3 (JAM3)

細胞程序性死亡蛋白6相互作用蛋白(PDCD6IP)重組蛋白  Recombinant Programmed Cell Death Protein 6 Interacting Protein (PDCD6IP)

Ana-1(小鼠巨噬細胞)5×106cells/瓶×2

SCaBER(人膀胱鱗細胞)5×106cells/瓶×2

MPC-11(小鼠漿細胞瘤)5×106cells/瓶×2

人腦膠質瘤細胞  HS683

人胚肺成纖維樣細胞  KMB

技術原理：
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。