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      螺旋體通用PCR檢測試劑盒說明書

      簡要描述:螺旋體通用PCR檢測試劑盒說明書上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:

      • 產(chǎn)品型號:50次
      • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      • 更新時間:2023-12-16
      • 訪  問  量:549

      詳細(xì)介紹

      注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

      產(chǎn)品名稱

      英文名稱

      貨號

       螺旋體通用PCR檢測試劑盒說明書

       Borrelia spp.PCR

      BK-P8900

      原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
       特異性強
      PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
      ①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
      ②堿基配對原則;
      ③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
      ?
      實驗過程:
      一、試劑準(zhǔn)備
      1. DNA模板
      2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
      4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

      大車前苷 CAS 104777-68-6 *  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial

      迷迭香酸 CAS 20283-92-5 *  規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial

      表兒茶素沒食子酸酯 CAS 1257-08-5 *  規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial

       CAS 517-44-2 *  規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial

      人參皂甙RE CAS 51542-56-4 *  規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial

      百蕊草素I CAS 40437-72-7 *  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial

      莫諾甙 CAS 25406-64-8 *  規(guī)格: HPLC≥97%;20mg/vial

      黃芩素 CAS 491-67-8 *  規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial

      紅花苷II CAS 55750-84-0 *  規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial

      木通皂甙 D CAS 39524-08-8 *  規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial

      潑松龍/潑松 CAS  *  規(guī)格: 0.25g

      槲皮苷 CAS 522-12-3 *  規(guī)格: 20mg

      重樓對照藥材 CAS  *  規(guī)格: 1g

      基苯酞 CAS 551-08-6 *  規(guī)格: 20mg

      CAS 63968-64-9 *  規(guī)格: 20mg

      螺旋體通用PCR檢測試劑盒說明書TE-10(人食管細(xì)胞)人腎皮層上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

      MV3(人色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

      絲蛋白結(jié)合LIM蛋白1(FBLIM1)重組蛋白  Recombinant Filamin Binding LIM Protein 1 (FBLIM1)

      熱帶假絲酵母 Candida tropicalisCOLO 205(人結(jié)腸細(xì)胞)

      饑餓素-O-乙?;D(zhuǎn)移酶(GOAT)重組蛋白  Recombinant Ghrelin-O-Acyltransferase (GOAT)

      人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

      大鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

      C6(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

      考馬斯亮藍(lán)G-250人少突膠質(zhì)細(xì)胞

      SD-39瓊脂/SD-39 Agar濾膜法大腸桿菌O157的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

      普雷恩毛霉 Mucor prainii人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基

      技術(shù)原理:
       DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
             在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
             發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。

       

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